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技術(shù)文章

多了解一些,才能更好地使用Elisa試劑盒
點(diǎn)擊次數(shù):495 更新時(shí)間:2022-03-25
  Elisa試劑盒用于人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中白介素18(IL-18)的測(cè)定。采用的是雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定樣品中人白介素18(IL-18)的水平。向預(yù)先包被了人白介素18(IL-18)單克隆抗體的酶標(biāo)孔中加入白介素18(IL-18),溫育;溫育后,加入標(biāo)記的抗白介素18(IL-18) 抗體,再與鏈霉親和素-HRP結(jié)合,形成免疫復(fù)合物,再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶,然后加入底物A、B,產(chǎn)生藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺與樣品中人白介素18(IL-18)的濃度呈正相關(guān)。
 
  Elisa試劑盒的使用須知:
 
  1.分析前質(zhì)控
 
 ?、?特色 :在固相外表組裝免疫活性物質(zhì)形成“免疫吸附劑”;
 
 ?、?酶標(biāo)記免疫活性物質(zhì),進(jìn)行信號(hào)擴(kuò)大;
 
 ?、?有二步溫育反應(yīng)二次洗滌過(guò)程;
 
 ?、?靈敏度特異性相對(duì)較高;
 
  ⑤ 局限性:只能檢測(cè)到ng;
 
 ?、?精密度差(批內(nèi)CV15-20%);
 
  ⑦ 線性規(guī)模窄(一個(gè)數(shù)量級(jí));
 
  ⑧ 存在"HD-HOOK"效應(yīng)。
 
  2.試驗(yàn)檢測(cè)人員需經(jīng)過(guò)培訓(xùn),把握這幾方面的技術(shù)知識(shí):
 
  ① 檢驗(yàn)項(xiàng)目的基本原理;
 
  ② 臨床意義;
 
  ③ 熟悉檢測(cè)技巧,了解易出差錯(cuò)的環(huán)節(jié)及難點(diǎn);
 
 ?、?熟悉檢測(cè)試劑功能(包括試劑盒組成,包被片段及其組成);
 
  ⑤ 熟悉檢測(cè)儀器的原理及功能;
 
 ?、?把握數(shù)據(jù)處理的能力和質(zhì)量操控知識(shí);
 
 ?、?某些特別項(xiàng)目的檢測(cè)如抗HIV等需經(jīng)有關(guān)部門組織的專門培訓(xùn)班,考試合格后持證上崗。

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