當(dāng)前位置：常見的Elisa試劑盒實驗對照方法分享
點擊次數(shù)：580 更新時間：2022-03-18
Elisa試劑盒不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查，而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此，也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來測定抗體，而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原，所以也是一種早期診斷的良好方法。
由于是單細(xì)胞水平檢測，ELISPOT比ELISA更靈敏，能從20萬-30萬細(xì)胞中檢出1個分泌該蛋白的細(xì)胞。
捕獲抗體具有高親和力、高特異性、低內(nèi)毒素的單抗，ELISA試劑盒在研究者以刺激劑激活細(xì)胞時，不會影響活化細(xì)胞分泌細(xì)胞因子。
目前ELISA法仍在研究當(dāng)中占有著主流地位，ELISA試劑盒的普遍應(yīng)用使得實驗更加方便、經(jīng)濟和準(zhǔn)確，ELISPOT技術(shù)的優(yōu)點也決定了它的發(fā)展?jié)摿?。LISPOT法來源于ELISA，相比較傳統(tǒng)的ELISA法有所突破，是定量ELISA技術(shù)的延伸和發(fā)展。由于游離的循環(huán)抗體或CK的半哀期不同，使之在體液中不斷的被代謝或與靶器官結(jié)合，傳統(tǒng)的酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)不能確切的反映體內(nèi)的抗體及CK的水平。80年代，國外的科研工作者根據(jù)ELISA技術(shù)的基本原理，建立了體外檢測特異性抗體分泌細(xì)胞和CK分泌細(xì)胞的固相酶聯(lián)免疫斑點技術(shù)(ELISPOT)。
隨著ELISPOT技術(shù)的不斷發(fā)展，它的優(yōu)勢也漸漸顯示出來，下面將ELISPOT與ELISA法對比區(qū)分。
ELISA試劑盒通過顯色反應(yīng)，在酶標(biāo)儀上測定吸光度，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較得出可溶性蛋白總量。
ELISPOT 也是通過顯色反應(yīng)，在細(xì)胞分泌這種可溶性蛋白的相應(yīng)位置上顯現(xiàn)清晰可辨的斑點，可直接在顯微鏡下人工計數(shù)斑點或通過計算機輔助的分析系統(tǒng)對斑點進(jìn)行計數(shù)， 1個斑點代表1個細(xì)胞，從而計算出分泌該蛋白的細(xì)胞的頻率。(某些研究不僅要測細(xì)胞因子生成量，還需檢測分泌此細(xì)胞因子的細(xì)胞頻率)
