小鼠黑色素瘤+luc;B16F10-PLV-LUC-PURO細胞
本公司所有產品僅供科學實驗,不做其他科學實驗外的使用!
種屬 | 小鼠 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
生長特性 | 貼壁生長 | 鑒定 | STR鑒定正確 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣混有梭形細胞 | 編號 | GOY-01X1930 |
商品詳情:
細胞別稱;B16F10-OVA-LUC;小鼠黑色素瘤細胞-熒光素酶標記-OVA
種屬來源;小鼠
組織來源;皮膚
生長特性;貼壁生長
細胞形態(tài);上皮細胞樣混有梭形細胞
細胞代數;p3-p8
背景簡介;Luciferase B16-F10細胞穩(wěn)定表達螢火蟲熒光素酶??捎米魑灮鹣x熒光素酶活性檢測中的陽性對照,也可用于活體動物成像實驗。該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶Luc基因。B16-F10細胞是B16-F0細胞的亞系。
生物安全等級;1
細胞規(guī)格;1x106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
細胞培養(yǎng)操作:
1) 復蘇細胞:以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產品說明書為主。
將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入6 cm皿中,加入約4 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第三天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min(視細胞消化情況而定),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3) 細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數。
b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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細胞培養(yǎng)注意事項 :
一、 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象 發(fā)生請及時和我們聯系。
二、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現問題,責任由 客戶自行承擔。
三、用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
四、貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
五、 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
六、 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術部溝通 交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯系,告知細胞 的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
七、該細胞僅供科研使用。
八、備注:運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。
九、 注意: 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。
MIN6(小鼠胰島瘤細胞) | CATH.a(小鼠神經細胞) | EMT6 EMT-6 (小鼠乳腺癌細胞) | Renca RenCa (小鼠腎癌細胞) |
MLO-Y4 MLOY4 (小鼠骨樣細胞) | NIT-1 (小鼠胰島素瘤β細胞) | TtT/GF (小鼠垂體促甲狀腺濾泡星狀細胞) | WEHI 164 (鼠纖維肉瘤細胞) |
LM9 (小鼠HGPRT基因缺陷型骨肉瘤細胞) | TC-1 (小鼠肺上皮細胞) | ||