細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用。

SK-MEL-1人黑素瘤細(xì)胞

商品屬性

商品介紹

細(xì)胞介紹

該細(xì)胞由Oettgen F及其同事從一名29歲的患有廣泛、快速進(jìn)展性惡性黑色素瘤的白人男性患者的胸導(dǎo)管中分離建立的。該細(xì)胞可產(chǎn)生黑色素，電鏡檢測發(fā)現(xiàn)細(xì)胞中色素顆粒與自身合成和吞噬作用相關(guān)。在63%的惡性黑色素瘤患者和10%其他患者體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了針對該細(xì)胞系的抗體。

細(xì)胞特性

1） 來源：人 黑色素瘤

2） 形態(tài)：球形的，懸浮生長

3） 含量：>1x10^6 細(xì)胞數(shù)

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5）用途：僅供科研使用。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。

（9）細(xì)胞凍存

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠叉頭框蛋白P3(FoxP3)檢測試劑盒 ，英文名： FoxP3 ELISA Kit

Mouse L phenylalanine ammonia lyase (PAL) ELISA Kit 小鼠L苯解氨酶(PAL)檢測試劑盒

ELISA 小鼠粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(mouse GM-CSF)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforLDH(HumanLactateDehydrogenase)ELISAKit人乳酸脫氫酶

通用型N-乙酰轉(zhuǎn)移酶(NAT)活性高效液相層析法(HPLC)定量檢測試劑盒20次

ELISAKitIFN-γ猴γ干擾素

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IL16重組人 IL16 / Interleukin-16 蛋白 Protein

ENTPD3 Protein Human 重組人 ENTPD3 / NTPDase3 / CD39L3 蛋白

C Protein Mouse 重組小鼠 C / SLAMF2 / BCM1 蛋白

DAD1 (dopamine D1 receptor 1mgDAD1 (dopamine D1 receptor) 多巴胺受體-D1抗原

ENTPD3 Protein Human 重組人 ENTPD3 / NTPDase3 / CD39L3 蛋白

CDH13重組大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 蛋白 Protein

C Protein Mouse 重組小鼠 C / SLAMF2 / BCM1 蛋白

IL16重組人 IL16 / Interleukin-16 蛋白 Protein

SK-MEL-1人黑素瘤細(xì)胞小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat soluble receptor activator of nuclear factor kappa B ligand (sRANKL) ELISA Kit 大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)檢測試劑盒

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Humanai-gasicparietalcellaibody,AGPA/PCA檢測試劑盒人抗網(wǎng)硬蛋白抗體(ARA)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物賴(lysine)含量化學(xué)比色法定量檢測試劑盒20次

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小鼠補(bǔ)體成分5   英文名稱：   Mouse Compleme Compone 5   規(guī)格：      英文縮寫：   C5

小鼠結(jié)締組織生長因子   英文名稱：   Mouse Connective Tissue Growth Factor   規(guī)格：      英文縮寫：   CTGF

小鼠皮質(zhì)   英文名稱：   Mouse Coicosterone   規(guī)格：      英文縮寫：   CO

小鼠肌酐   英文名稱：   Mouse Creatinine   規(guī)格：      英文縮寫：   CT