產(chǎn)品展示
COLO320人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞
商品屬性
鑒定 | STR鑒定正確 | 種屬 | 人 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 分類 | 人細(xì)胞系 |
商品介紹
細(xì)胞介紹
該細(xì)胞能合成復(fù)合胺,腎上腺素。
細(xì)胞特性
1)來(lái)源:人結(jié)腸癌
2)形態(tài):貼壁生長(zhǎng),貼不牢
3)含量:>1x106細(xì)胞數(shù)
4)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
5)用途:僅供科研使用。
細(xì)胞處理:
1) 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來(lái)終止消化。
3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3)細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:
(1)當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí),進(jìn)行傳代。
(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落,加入2倍量的中止消化,并吹打均勻,避免消化過(guò)度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
(9)細(xì)胞凍存
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠血小板激活因子(PAF)檢測(cè)試劑盒 ,英文名: PAF ELISA Kit
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CLIAKitforHumancoagulationfactorII,FIIELISAKit人Ⅱ
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COLO320人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞小鼠白介素35(IL-35)檢測(cè)試劑盒 96T/48T
Rat heat shock factor 1 (HSF1) ELISA Kit 大鼠熱休克因子1(HSF1)檢測(cè)試劑盒
Humayrosinekinase2,Tyk-2ELISAKit 人酪激酶2(Tyk-2)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCalretinin,CR檢測(cè)試劑盒人鈣結(jié)合蛋白(CR)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
重組逆轉(zhuǎn)錄病毒穩(wěn)態(tài)表達(dá)細(xì)胞克隆凍存試劑盒50次
Humansolubleierleukin-1receptorⅠ,IL-1sRⅠELISAKit人白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔子免疫球蛋白G檢測(cè)試劑盒 兔子免疫球蛋白G試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子免疫球蛋白G試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:檢測(cè)試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子免疫球蛋白G試劑盒、兔子免疫球蛋白G 檢測(cè)試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔子免疫球蛋白E檢測(cè)試劑盒 兔子免疫球蛋白E試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子免疫球蛋白E試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:檢測(cè)試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子免疫球蛋白E試劑盒、兔子免疫球蛋白E 檢測(cè)試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔子免疫球蛋白A檢測(cè)試劑盒 兔子免疫球蛋白A試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子免疫球蛋白A試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:檢測(cè)試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子免疫球蛋白A試劑盒、兔子免疫球蛋白A 檢測(cè)試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔子可溶性CD40配體檢測(cè)試劑盒 兔子可溶性CD40配體試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子可溶性CD40配體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:檢測(cè)試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子可溶性CD40配體試劑盒、兔子可溶性CD40配體檢測(cè)試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
細(xì)胞接收后的處理:
1)收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2)請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上,可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中,若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。