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小鼠的牛血清白蛋白殘留檢測酶聯免疫elisa試劑盒保存標本要求
.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后5分鐘以內進行。
小鼠的牛血清白蛋白殘留檢測酶聯免疫elisa試劑盒保存保證產品質量,*,質量可靠,靈敏度高,效果穩(wěn)定。等優(yōu)點已經得到廣大客戶的認可,您可放心,且我司有專門的售后部門對您進行全線跟蹤。
產品名稱:
英文名稱:Mouse rudimental bovine serum albumin check-up ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
存儲條件:2-8℃
有效期:6個月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關蛋白無交叉反應。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床 。
類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測抗體、
(四)競爭法。
技術流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標抗體:于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
對甲胺藍(BCIP) 英文名稱: Toluidineblue(BCIP) : 6578/6/9 分子式: 433.62 分子量: C8H6BrCINO4PC7H9N
對甲酚 英文名稱: Paracresol : 06-44-5 分子式: 08.4 分子量: C7H8O
對甲磺酸2,6-二甲吡鎓鹽 分子式: 279.35 分子量: C4H7NO3S 英文名稱: P-toluenesulfonicacid2,6-twomethylpyridiniumsalt : 76h
對甲磺酰 分子式: 86.23 分子量: C7H0N2O2S;CH3C6H 英文名稱: Paratoluenesulfonicacid : 576-35-8
對甲氧甲酰 分子式: 66.8 分子量: C8H0N2O2 英文名稱: Onthemethylgroupofthe : 3290-99-
對甲氧偶氮 分子式: 22.25 分子量: C3H2N2O 英文名稱: Onmethoxyazobenzene : 2396-60-3
對克利西丁--對磺偶合劑 英文名稱: ToCliffordXiding-p-aminobenzenesulfonatecouplers : 40947-69- 分子式: 32.35 分子量: C4H5N3O4S
對氯芐并咪唑 分子式: 242.7 分子量: C4HClN2 英文名稱: P-chlorobenzylbenzimidazole : 5468-66-6
對氯碘 分子式: 238.45 分子量: C6H4ClI 英文名稱: Thechlorineiodobenzene : 637-87-6
對氯酚 英文名稱: Parachlorophenol : 06-48-9 分子式: 28.56 分子量: C6H5OCl
對氯甲 英文名稱: Chlorinetoluene : 06-43-4 分子式: 26.59 分子量: C7H7Cl
對氯甲并噁唑 分子式: 243.69 分子量: C4H0ClNO 英文名稱: Thechloromethylphenylbenzoxazole : 57864-9-4
對氯三氟甲 分子式: 80.6 分子量: C7H4ClF3 英文名稱: Tothreef : 98-56-6
對氯三氟甲氧 分子式: 96.55 分子量: C7H4ClF3O 英文名稱: Onthechlorinethree : 46-8-4免疫蛋白清除劑 20 次
*0 化學感受態(tài)細胞 0.mL×0
山羊抗小鼠 IgG(H+L),異硫氰酸熒光素標記 00 μL
抗Ⅲ,0mg/mL mL
葡聚糖 T-40 0g
DNA Sarkosyl( 十二烷基肌氨酸 ) 00g
阿拉伯樹膠粉 00g
TE 緩沖液,PH7.0 0mL
g
山羊抗兔 IgG(H+L),辣根過氧化物酶標記 000μL
L- 乳酸脫氫酶 ( 兔肌 ) 2.5ku
DTT,免稱量蛋白 48 管
2-262 Y089 菌種 mL