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人成骨細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒【Human Bone PrimacellTM：Osteblasts】
     人成骨細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒費(fèi)用骨代謝過程中，成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞相互協(xié)調(diào)，使骨質(zhì)的形成與吸收處于一種動(dòng)態(tài)平衡，維持骨骼的不斷更新。其中，成骨細(xì)胞是骨形成細(xì)胞，對(duì)骨組織的生長發(fā)育、骨代謝平衡、骨量平衡和骨損傷修復(fù)起關(guān)鍵作用。體外培養(yǎng)成骨細(xì)胞，作為常用的體外實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停蔀檠芯抗巧?、病理及修?fù)的重要手段，也成為研究成骨細(xì)胞生長代謝及骨組織工程的基礎(chǔ)。 雖然骨組織機(jī)械韌性很強(qiáng)，但利用本公司試劑盒中提供的骨組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的薄的骨組織片能使得骨組織中成骨細(xì)胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將成骨細(xì)胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養(yǎng)新生兒或成年人的成骨細(xì)胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個(gè)細(xì)胞的效率是已出版文獻(xiàn)中所報(bào)道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細(xì)胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養(yǎng)的成骨原代細(xì)胞中成纖維細(xì)胞的含量。 人成骨細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)人的成骨組織細(xì)胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM人成骨細(xì)胞組織解離液(3×ml) （2）人成骨細(xì)胞組織處理緩沖液(00ml) （3）FibrOutTM人成骨細(xì)胞成纖維抑制劑ml(500X) （4）人成骨組織洗液(5 x 00 ml) （5）人成骨細(xì)胞生長因子(ml500X)及血清(5x0ml) （6）人成骨細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基(5 x 00ml) （7）人成骨組織預(yù)備液( x 00 ml) （8）人成骨細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書
培養(yǎng)步驟：
人成骨細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒費(fèi)用對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

苜蓿中華根瘤菌美麗鏈霉菌 Streptomyces bellus

HFL(人肺成纖維細(xì)胞)屎腸球菌 Enterococcus faecium

酸球菌 Lactococcus lactis釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

SF9, 昆蟲卵巢細(xì)胞人胚腎細(xì)胞

戊糖桿菌 Lactobacillus pentosusCSC, 小鼠心肌細(xì)胞

毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

巴氏醋桿菌羅旺亞種 Acetobacter pastuerianus subsp. lovani猴菌 Hericium erinaceus

293T(人胚腎細(xì)胞)AR42J(大鼠胰腺外分泌細(xì)胞)

挪威假絲酵母 Candida norvegensis釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

百脈根根瘤菌 Rhizobium loti綠僵菌 Metarhizium sp.

人成骨細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒費(fèi)用4-(三氟甲)分子式：76.4英文名稱：4- (three trifluoromethyl) phenyl hydrazine：368-90-分子量： C7H7F3N2

DL-α-Tocopherolmethoxypolyethyleneglycolsuccinatesolution英文名稱：DL- -Tocopherol methoxypolyethylene glycol succinate solution分子式：分子量：：309573-60-

甲硫新斯的明英文名稱：New Ming of methyl sulfate分子式：303.2分子量： C2H9BrN2O2：5-60-5

英文名稱：Flumazenil分子式：303.29分子量： C5H4FN3O3：78755-8-4

鄰三酚紅英文名稱：The adjacent benzene three phenol red分子式：400.36分子量： C9H2O8S：32638-88-3

5---(β-羥乙)吡唑分子式：27.4英文名稱：5- amino -- (2-hydroxyethyl) pyrazole：7366-27-0分子量： C5H9N3O

2-氟三氟甲氧分子式：80.英文名稱：2- f three f：206-8-5分子量： C7H4F4O

3--5-羥吡分子式：0.英文名稱：3- amino -5- hydroxy pyridine：60003分子量： C5H6N2O

3,6-二溴咔唑分子式：325英文名稱：3,6- dibromo carbazole：6825-20-3分子量： C2H7Br2N

人參皂甙Rh2英文名稱：Ginsenoside Rh2分子式：622.87268分子量：C36H62O8：7824-33-2

注意事項(xiàng)：
. 接收到人成骨細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒費(fèi)用，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。