產(chǎn)品展示
公司向您大鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)的詳細(xì)說明:了解更多原代細(xì)胞提取物點(diǎn)擊進(jìn)
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 價(jià)格 |
大鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物培養(yǎng) | Rat Brain: Normal Cerebral Venous Vascular Endothelial CellsDerivatives | 來電可享受優(yōu)惠 |
大鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物【Rat Brain: Normal Cerebral Venous Vascular Endothelial CellsDerivatives】
大鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)大鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物是從大鼠原代腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞提取的,大鼠原代腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞從正常大鼠腦組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA*鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及0mg總RNA。68℃反應(yīng)0min 后終止RT反應(yīng)。利用x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA, μl cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 50mM NaCl, mM EDTA, mM EGTA, % NP-40 , mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人血管組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, % SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 潛在的應(yīng)用: <>已知基因的PCR克隆;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標(biāo)測序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學(xué);<6>芯片研究與表達(dá)圖譜。
培養(yǎng)步驟:
大鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按:2到:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?
兔抗POLE3多克隆抗體 英文名:Anti-POLE3 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗HAO多克隆抗體 英文名:Anti-HAO rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗CYP20A多克隆抗體 英文名:Anti-CYP20A rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗HP多克隆抗體 英文名:Anti-HP rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗CCT2多克隆抗體 英文名:Anti-CCT2 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗CCT4多克隆抗體 英文名:Anti-CCT4 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗CCT5多克隆抗體 英文名:Anti-CCT5 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗CMPK多克隆抗體 英文名:Anti-CMPK rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗CPM多克隆抗體 英文名:Anti-CPM rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗ARS多克隆抗體 英文名:Anti-ARS rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗EEFB2多克隆抗體 英文名:Anti-EEFB2 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗EIF3I多克隆抗體 英文名:Anti-EIF3I rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
大鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)35mm培養(yǎng)皿 20套 包
Van Gieson 染色液(VG染色液) 50ml 瓶
Tranilast 曲尼司特 53902-2-8 00mg
Glycerol 甘油 500ml 瓶
Papain 木瓜蛋白酶 5g 瓶
Pepsin:3000 :3000 5g 瓶
Solar Fluor 555(效果同Alexa Fluor 555) 5 mg 支
Microcystin-LR 微囊藻毒素LR 0043-37-2 00μg
BSTFA containing % TMCS N,O-雙(*硅烷基)三乙酰胺(含%TMCS) 25ml 瓶
Hanks(含鈣鎂,含酚紅) 500ml 瓶
L(+)-Tartaric acid L-酒石酸 87-69-4 20mg
注意事項(xiàng):
. 接收到大鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物培養(yǎng),肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞00X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
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