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大鼠腦靜脈血管組織提取物培養(yǎng) | Brain: Normal Rat Cerebral Venous Vascular Derivatives | 來電可享受優(yōu)惠 |
大鼠腦靜脈血管組織提取物【Brain: Normal Rat Cerebral Venous Vascular Derivatives】
大鼠腦靜脈血管組織提取物培養(yǎng)腦組織是指包容在顱腔內的三大塊神經纖維組織:大腦、腦干和小腦。公司科技提供來自新鮮或冷凍大鼠腦靜脈血管組織中高質量的總RNA,PCR準備的*條cDNA鏈,蛋白質及其亞組分。所有的產品在發(fā)貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA*鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及0mg總RNA。68℃反應0min 后終止RT反應。利用x RT Buffer 運輸cDNA, μl cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發(fā)貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證產品的質量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 50mM NaCl, mM EDTA, mM EGTA, % NP-40 , mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人血管組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, % SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 潛在的應用: <>已知基因的PCR克??;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標測序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測與蛋白質組學;<6>芯片研究與表達圖譜。
培養(yǎng)步驟:
大鼠腦靜脈血管組織提取物培養(yǎng)對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按:2到:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?
兔抗EFNB3多克隆抗體 英文名:Anti-EFNB3 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗ARHGIB多克隆抗體 英文名:Anti-ARHGIB rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗TAF多克隆抗體 英文名:Anti-TAF rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗KLHL4多克隆抗體 英文名:Anti-KLHL4 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗MT-N5多克隆抗體 英文名:Anti-MT-N5 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗PROK多克隆抗體 英文名:Anti-PROK rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗PTOV多克隆抗體 英文名:Anti-PTOV rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗TGFB多克隆抗體 英文名:Anti-TGFB rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗TGFB多克隆抗體 英文名:Anti-TGFB rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗SLC2A3多克隆抗體 英文名:Anti-SLC2A3 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗HOXB9多克隆抗體 英文名:Anti-HOXB9 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗HOXB7多克隆抗體 英文名:Anti-HOXB7 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
大鼠腦靜脈血管組織提取物培養(yǎng)3-叔丁基-4-羥基茴香醚標準品 英文名稱3-tert-Butyl-4-hydroxyanisole 規(guī)格?。?00mg CAS:2-00-6 進口、國產
甲基叔丁基醚標準品 英文名稱tert-Butylmethyl ether 規(guī)格?。?2ml×3ampules CAS:634-04-4 進口、國產
羥苯丁酯標準品 英文名稱Butylparaben 規(guī)格?。?00mg CAS:94-26-8 進口、國產
骨化二醇標準品 英文名稱Calcifediol 規(guī)格?。?5mg CAS:63283-36-3 進口、國產
卡角林標準品 英文名稱Cabergoline 規(guī)格?。?5mg CAS:8409-90-7 進口、國產
標準品 英文名稱 規(guī)格?。?0mg CAS: 進口、國產
雜質標準品 英文名稱 規(guī)格?。?0mg CAS: 進口、國產
鈣三醇標準品 英文名稱 規(guī)格?。?mg CAS:32222-06-3 進口、國產
溶液標準品 英文名稱Calcitriol Solution 規(guī)格 :5ml CAS:32222-06-3 進口、國產
醋酸鈣標準品 英文名稱Calcium Acetate (AS) 規(guī)格 :g CAS:62-54-4 進口、國產
抗壞血酸鈣標準品 英文名稱Calcium Ascorbate 規(guī)格 :200mg CAS:5743-28-2 進口、國產
碳酸鈣標準品 英文名稱Calcium Carbonate (AS) 規(guī)格 :g CAS:47-34- 進口、國產
氯化鈣標準品 英文名稱Calcium Chloride (AS) 規(guī)格?。篻 CAS:0035-04-8 進口、國產
注意事項:
. 接收到大鼠腦靜脈血管組織提取物培養(yǎng),肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
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