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2V6.11 (人胚腎細(xì)胞)

2V6.11 (人胚腎細(xì)胞)

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2V6.11 (人胚腎細(xì)胞)正在出售的產(chǎn)品:CLEC4D Others Human 人 CLEC4D / CLECSF8 人細(xì)胞裂解液 ECV-304細(xì)胞,人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 銅綠假單胞桿菌(綠膿桿菌) 人真皮成纖維細(xì)胞-總RNAHDF-a NA SERPIND1 Others Mouse 小鼠 SerpinD1 /

2V6.11 (人胚腎細(xì)胞) 詳細(xì)資料

細(xì)胞處理:

2V6.11 (人胚腎細(xì)胞)
1) 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3)細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用。

2V6.11 (人胚腎細(xì)胞)

2V6.11 (人胚腎細(xì)胞)


2V6.11 (人胚腎細(xì)胞)

2V6.11 (人胚腎細(xì)胞)

商品屬性2V6.11 (人胚腎細(xì)胞)

種屬

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

生長特性

貼壁

鑒定

STR鑒定正確

細(xì)胞形態(tài)

上皮細(xì)胞樣

編號

GOY-01X0312

 

商品介紹

2V6.11 (人胚腎細(xì)胞)

種屬 人類

年齡(性別) 男性,胎兒

組織來源 腎;用腺病毒5(Ad5)DNA轉(zhuǎn)化;用腺病毒前區(qū)4質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染

生長特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

參考資料(來源文獻)

2V6.11細(xì)胞是2001年從人胚腎細(xì)胞株293 [HEK-293]衍化而來,293 [HEK-293]細(xì)胞用攜帶Zeocin-抗性標(biāo)記的質(zhì)粒pVgRXR轉(zhuǎn)染得到293pVgRXR細(xì)胞。隨后,用包含編碼E4 24KAd5 E4ORF6基因的質(zhì)粒pEKORF6轉(zhuǎn)染。pEKORF6從包含潮霉素抗性基因的質(zhì)粒pIndHydro衍生而來,載體包含SV40病毒序列。2V6.11細(xì)胞株最初從含潮霉素的培養(yǎng)液中用克隆環(huán)分離單克隆得到。2V6.11細(xì)胞誘導(dǎo)表達的人腺病毒E4 34KDa蛋白可通過免疫印跡法檢測;2V6.??

 

生長培養(yǎng)基 MEM10% FBS1% P/S

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2~3/

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

溫度:37

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:

2V6.11 (人胚腎細(xì)胞)
(1)當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達到90%時,進行傳代。

(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。

(3)加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落,加入2倍量的中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。

(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。

(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。

(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。

(8)根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。

(9)細(xì)胞凍存

2V6.11 (人胚腎細(xì)胞)


細(xì)胞接收后的處理:

2V6.11 (人胚腎細(xì)胞)
1)收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。

2)請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達70%-80%以上,可以對細(xì)胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。

公司正在出售的產(chǎn)品:
2V6.11 (人胚腎細(xì)胞)

大鼠小白蛋白(PVALB)檢測試劑盒 ,英文名: PVALB ELISA Kit

Pla vitamin B6 (VB6) ELISA Kit 植物B6(VB6)檢測試劑盒

MouseProstaglandinE2,PG-E2ELISAKit 小鼠前列腺素E2(PGE2)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanai-cailage-aibodyELISAKit人抗軟骨抗體

細(xì)胞GSK3β激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

ELISAKitLH大鼠促黃體激素

CTSL1重組人 Cathepsin L1 / CTSL1 蛋白 Protein

內(nèi)皮脂肪酶(LIPG)重組蛋白 Recombinant Lipase, Endothelial (LIPG)

PILRA重組人 PILR-alpha / PILRA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CD5L Protein Human 重組人 CD5L / API6 蛋白

NP Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) Nucleocapsid / NP

內(nèi)皮脂肪酶(LIPG)重組蛋白 Recombinant Lipase, Endothelial (LIPG)

CD5L Protein Human 重組人 CD5L / API6 蛋白

CTSL1重組人 Cathepsin L1 / CTSL1 蛋白 Protein

NP Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) Nucleocapsid / NP

PILRA重組人 PILR-alpha / PILRA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

2V6.11 (人胚腎細(xì)胞)小鼠血管活性腸肽(VIP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human granulocyte chemotactic protein -2 (GCP-2/CXCL6) ELISA Kit 人粒細(xì)胞趨化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)檢測試劑盒

Humandermatansulfate,DSELISAKit 人硫酸皮膚素(DS)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Chicken1,3-βDglucosidase,1,3-βD-Glu檢測試劑盒雞1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

遠(yuǎn)西方雜交(FARWESTERNBLOT)印跡同位素檢測試劑盒5

MouseIgGELISAKit小鼠IgG檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

小鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠血纖蛋白原(Fbg)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠血栓素B2(TXB2)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠血栓素A2TXA2)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝


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