產(chǎn)品展示
細(xì)胞處理:
1) 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3)細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。
SUP-B15 (人Ph+急淋白血病細(xì)胞系)
商品屬性
鑒定 | STR鑒定正確 | 種屬 | 人 |
生長(zhǎng)特性 | 懸浮 | 細(xì)胞形態(tài) | 淋巴細(xì)胞樣 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 分類 | 人細(xì)胞系 |
商品介紹
別稱 Sup-B15; SUPB-15; SUPB15; SupB15; SupB15W; SupB15WT
年齡(性別) 8歲
組織來源 骨髓;急性淋巴母細(xì)胞白血??;B淋巴母細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 懸浮細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 淋巴細(xì)胞樣
參考資料(來源文獻(xiàn))
SUP-B15細(xì)胞來源于一位B細(xì)胞全部為費(fèi)城染色體陽性的8歲小孩的骨髓。SUP-B15細(xì)胞表達(dá)多個(gè)B細(xì)胞標(biāo)記,但不表達(dá)T細(xì)胞標(biāo)記。β-2微球蛋白、Leu12、My7(CD13)、OKT9(CD71)、OKT10(CD38)及CALLA(CD10)抗體陽性。CB1、Leu1(CD5)、Leu2(CD8)、Leu3(CD4)、Leu4(CD3)、Leu5(CD2)、Leu6(CD1a)、Leu9、LeuM1(CD15)、My9(CD33)、表面抗原(sIg-)及Epstein-Barr病毒陰性。 |
生物安全等級(jí) 1
生長(zhǎng)培養(yǎng)基 IMDM+0.05mM β-mercaptoethanol+20% FBS+1% P/S
推薦傳代比例 1:2-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時(shí)間 ~20-60 hours
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
抗原表達(dá)情況 CD1a -; CD2 -; CD3 -; CD4 -; CD5 -; CD8 -; CD10+; CD13+; CD38+; CD71+; HLA DR+
基因表達(dá)情況 immunoglobulin (cytoplasmic)
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:
(1)當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí),進(jìn)行傳代。
(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落,加入2倍量的中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
(9)細(xì)胞凍存
細(xì)胞接收后的處理:
1)收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2)請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上,可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中,若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠淋巴毒素β(LTβ)檢測(cè)試劑盒 ,英文名: LTβ ELISA Kit
Mouse inhibin A (INH-A) ELISA Kit 小鼠抑制素A(INH-A)檢測(cè)試劑盒
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F3 Protein Human 重組人 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
FZD1 Protein Mouse 重組小鼠 Frizzled-1 / FZD1 蛋白
CNGA2(Cyclic Nucleotide Gated Cation Alpha 2 0.5mgCNGA2(Cyclic Nucleotide Gated Cation Alpha 2) 環(huán)核苷酸陽離子通道蛋白α2抗原
F3 Protein Human 重組人 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
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SUP-B15 (人Ph+急淋白血病細(xì)胞系)小鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α (sm Actinin-α)ELISA 試劑盒 96T/48T
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植物染色質(zhì)免疫沉淀分析(CHIP)試劑盒(包括抗體)10次
humanulasensitivethyroid-stimulatinghormone,U-TSHELISAKit人高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠β細(xì)胞素(BTC)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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